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杀稻瘟菌素S • Blasticidin S

杀稻瘟菌素 S • Blasticidin S

Blasticidine S hydrochloride

≥98.0% (HPLC)

别名 : Blasticidin S

经验分子式(希尔表示法) C17H26N8O5 • HCl

分子量 458.90     纯度: >95%HPLC    浓度: 10 mg/ml in HEPES 缓冲液, pH 7.5     

结 构 :

 

 

 

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60218ES10-10mg 1ml

Blasticidin S    - YEASEN

 

598.00

4°C

60218ES60-100mg 10*1ml

Blasticidin S    - YEASEN

 

4200.00

20°C

作用机理
Blasticidin S 是一种来自 Streptomyces griseochromogenes的核苷肽类抗生素,通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性抑制原核和真核生物的蛋白质合成。 Blasticidin S用于筛选携带有 bsrBSD耐受基因的转染细胞。杀稻瘟菌素具有快速而强效的作用模式,很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。
应用浓度:

1 Escherichia coli(推荐浓度: 25-100 µg/ml

E. coli Blasticidin  S的敏感性稍差,转化子对 Blasticidin S具有耐受性,可以用低盐 LB培养基( pH  8)进行筛选,添加 100 μg/mlBlasticidin S。高 pH值可以提高 Blasticidin S的活性。推荐使用 InvivoGens Fast-Media ®Blas以获得最好结果。

2 )哺乳动物细胞(推荐浓度: 1-50 µg/ml

哺乳动物细胞中 Blasticidin S的工作浓度范围在 1-50 μg/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。

操作步骤(哺乳动物稳转株筛选):

Blasticidin S 通常使用浓度为 10 μg/ml。携带 bsrBSD基因的质粒转染到细胞中,在含有 Blasticidin S的正常生长培养基中孵育,用于筛选稳定转染细胞株。

1)转染后 48h,用含有适宜浓度 Blasticidin S的新鲜培养基将细胞传代;(注:细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高,抗生素效率降低。细胞分盘时覆盖率最好不超过 25%

2)每 3-4天去除培养基,加入含抗生素的新鲜培养基;

37天后检测细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染 /筛选效率,集落形成可能需要再增加一周或更久。

4)转移 5-10个耐受克隆到 35mm细胞盘中。加入选择培养基维持培养 7天。随后用细胞毒性实验进行检测。

本产品为化学试剂对人体可能有害,请做好安全防护工作,避免直接接触皮肤。

本产品仅用于科研用途,禁止用于人身上。部分信息来源于前尘

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