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线粒体 溶酶体 荧光探针选择

二、 线粒体
线粒体存在于真核细胞内,占细胞总体积的10%。线粒体是一种多形性细胞器,其结构因细胞类型、细胞周期阶段和细胞内的代谢状态不同而异。线粒体的主要功能是通过氧化磷酸化和脂质氧化生成能量。Life Technologies可提供用于活细胞线粒体染色的探针。
(图4) 牛肺动脉内皮细胞(BPAEC)染色dihydroethidium和MitoTracker Green FM的活细胞成像图。BPAEC经细胞通透的淡蓝色荧光的dihydroethidium、绿色荧光线粒体染料MitoTracker Green FM染色。氧化后,红色荧光的ethidium积累在细胞核中。
(图5) 人主动脉平滑肌细胞(HASMC)活细胞成像。HASMC转导入CellLight™ Golgi-GFP和CellLight™ Mitochondria-RFP,核酸用Hoechst 33342进行染色。
产品列表
货号 产品名称 Ex/Em 样本类型 可否固定 重要特性
M7514 MitoTracker® Green FM 490/516 活细胞 活细胞染料;染色不受线粒体功能影响。线粒体群的有效复染剂。据报道可特异性地染色经过固定的某些细胞
M7510 MitoTracker® Orange CMTMRos 554/576 活细胞 极佳的活细胞染料,适用于多色标记实验;固定后均可极好地保留在细胞内 (MitoTracker® Red FM 除外)
M7512 MitoTracker® Red CMXRos 579/599 活细胞
M22425 MitoTracker® Red FM 581/644 活细胞
M22426 MitoTracker® Deep Red FM 644/665 活细胞
M7511 MitoTracker® Orange CM-H2TMRos 554/576 活细胞 进入活细胞后,氧化形成可发出荧光的线粒体选择性探针MitoTracker® Red CM-H,然后被线粒体摄取,方可发出荧光
M7513 MitoTracker® Red CM-H2XRos 579/599 活细胞
C10600 CellLight® Mitochondria-GFP 485/510 活细胞 通过E1丙酮酸脱氢酶的前导序列特异性靶向线粒体的荧光蛋白;利用BacMam输送技术导入活细胞
C10601 CellLight® Mitochondria-RFP 485/510 活细胞
T3168 JC-1 514/529 (monomer)
485-589/590 (aggregate)
活细胞 应用广泛的阳离子染料,可以线粒体膜电位依赖性地聚集于线粒体内;JC-1 单体(低浓度)为绿色,高浓度聚集时发射的荧光变为红色,可用于膜电位的比率测定
I34154 Image-iT® LIVE Mitochondrial and Nuclear Labeling Kit 350/461 (Hoechst 33342)
579/599 (MitoTracker® Red)
活细胞 包含MitoTracker® Red CMXRos染料和Hoechst 33342,可在GFP转染的活细胞中实现线粒体和细胞核的高度选择性染色
三、 溶酶体和过氧化物酶体
溶酶体为单层膜包被的囊泡结构,内含多种消化酶,如糖苷酶、酸性磷酸酶、弹性蛋白酶、组织蛋白酶、羧肽酶及各种蛋白酶。该细胞器的功能是分解废物及细胞碎片。过氧化物酶体是膜包被的细胞器,位于细胞质内。它们负责去除细胞中有害的过氧化物,且在脂肪酸代谢过程中发挥了重要的作用。Life Technologies可提供活细胞溶酶体染色探针及活细胞和固定细胞的过氧化物酶体染色探针。
(图6) 牛肺动脉内皮细胞经MitoFluor™ Far Red 680、LysoTracker® Green DND-26和Hoechst 33342染色的活细胞成像图。MitoFluor™ Far Red 680累积在线粒体中,绿色荧光的LysoTracker® Green DND-26累积在溶酶体中,Hoechst 33342染色细胞核。
(图7) HeLa细胞经Image-iT® LIVE Lysosomal and Nuclear Labeling Kit染色的活细胞成像图。HeLa细胞转染pShooter vector pCMV/myc/mito/GFP后,用Image-iT® LIVE Lysosomal and Nuclear Labeling Kit染色。溶酶体为LysoTracker® Red DND-99染色,细胞核为Hoechst 33342染色。
产品列表
货号 产品名称 Ex/Em 样本类型 可否固定 重要特性
L7525 LysoTracker® Blue DND-22 373/422 活细胞 只需纳摩尔级浓度,对酸性细胞器具有高选择性,几乎不对线粒体染色,可用于活细胞中酸性细胞器的标记和追踪,染料可快速导入
L7526 LysoTracker® Green DND-26 504/511 活细胞 可被活细胞极快速地吸收;加入染料后 1 至 5 分钟即可达到最佳成像效果
L7528 LysoTracker® Red DND-99 577/590 活细胞 染料可快速导入,只需纳摩尔级浓度,对酸性细胞器具有高选择性,几乎不对线粒体染色,可用于活细胞中酸性细胞器的标记和追踪
L7533 LysoSensor™ Blue DND-167 373/425 活细胞 LysoSensor™染料为活细胞染料,在pH7 时无荧光,酸化后,荧光强度的增加具有 pH依赖性
L7534 LysoSensor™ Green DND-153 442/505 活细胞
L7545 LysoSensor™ Yellow/Blue DND-160 329/440 活细胞
L22460 LysoSensor™ Yellow⁄Blue dextran, 10,000 MW, Anionic 335/452 活细胞
I34202 Image-iT® LIVE Lysosomal and Nuclear Labeling Kit 350/461 (Hoechst 33342)
577/590 (LysoTracker® Red DND-99)
活细胞 包含LysoTracker® Red DND-99染料和Hoechst 33342,可在GFP转染的活细胞中实现溶酶体和细胞核的高度选择性染色
C10596 CellLight® Lysosomes-GFP 488/510 活细胞 靶向溶酶体关联膜蛋白1的荧光蛋白;可用于观察活细胞中的溶酶体及其相关的过程——吞噬作用、内吞作用、自噬作用
C10597 CellLight® Lysosomes-RFP 555/584 活细胞
C10604 CellLight™ Peroxisome-GFP 488/510 活细胞 通过过氧化物酶体 C- 末端靶序列特异性地靶向过氧化物酶体的荧光蛋白;可用于活细胞染色
S34201 SelectFX® Alexa Fluor® 488 Peroxisome Labeling Kit 495/519 固定细胞 用于固定细胞中过氧化物酶体标记的试剂盒,提供直接靶向过氧化物酶体膜蛋白 70 (PMP 70) 的一抗、 Alexa Fluor® 488 标记的二抗、 PBS 、封闭液、固定剂和透化液

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